氧化應激檢測用探針（橙色）

ROSBrite 570, for oxidative stress detection

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

活性氧（Reactive oxygen species, ROS）是一類(lèi)含氧的化學(xué)性質(zhì)活躍分子，包括超氧化物、羥基自由基、單線(xiàn)態(tài)氧和過(guò)氧化物。由于存在未配對價(jià)殼電子，ROS具強反應性。ROS在細胞信號通路和穩態(tài)中發(fā)揮重要的作用，在氧的正常代謝下形成天然副產(chǎn)物。然而，在環(huán)境應激比如紫外照射或熱曝光，ROS水平急劇上升，對細胞結構造成顯著(zhù)損傷，這就是所謂的氧化應激（Oxidative stress）。處于氧化應激條件下，ROS產(chǎn)量急劇提高，引起下游的膜脂質(zhì)、蛋白和核酸發(fā)生結構變化。這些分子的氧化損傷與衰老以及大量病理事件相關(guān)，包括動(dòng)脈粥樣硬化、癌變、缺血再灌注損傷和神經(jīng)衰退紊亂。

ROSBrite 570是一種新型熒光探針，用來(lái)測定細胞氧化應激。具細胞膜滲透性，本身無(wú)熒光，一旦被ROS氧化后，產(chǎn)生明亮的橙色熒光（Ex/Em=556/566nm）。這一熒光可用熒光顯微鏡、高通量成像儀、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，至少1年有效。 

產(chǎn)品使用：

1、 儲存液制備

將低溫保存的產(chǎn)品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min。低速離心3-5min。之后往瓶?jì)燃尤脒m量無(wú)水DMSO充分溶解配成10~20mM儲存液（比如，1mg ROSBrite 570（MW:732.81）加入136μl DMSO，充分溶解混勻后即得到10mM儲存液）。按照單次用量分裝凍存，避免反復凍融，至少3個(gè)月穩定。

2、 工作液準備

正式實(shí)驗前，或取粉末按照【儲存液制備】用DMSO溶解，或于室溫融化一管DMSO儲存液。

用HBSS、PBS或其他緩沖液稀釋儲存液到適宜的工作濃度（比如：比如：5-10μM工作液），適宜的工作液濃度請自行優(yōu)化。工作液現配現用。

3、 操作方法（針對細胞）

3.1 用藥物處理細胞。

3.2用PBS清洗細胞1-2次。

3.3 更換含ROSBrite 570的染色工作液（步驟2新鮮配制）加入細胞，于37℃孵育15~30min。按照自身實(shí)驗需求來(lái)優(yōu)化探針的工作濃度和加載時(shí)間。

3.4更換不含染料的HHBS或其它生理緩沖液加入細胞。

3.5用適宜的儀器來(lái)檢測。（比如：熒光顯微鏡、流式細胞儀等。

附錄I 活性氧檢測探針匯總表：

注意事項：

1.      整個(gè)操作過(guò)程中注意避光。

2.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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