產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
嘌呤霉素(Puromycin)是白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)產(chǎn)生的一種氨基糖苷類(lèi)抗生素,可快速、高效地終止真核與原核生物的蛋白質(zhì)合成。其結構與氨酰-tRNA3′末端相似,能進(jìn)入核糖體A位并摻入延伸中的肽鏈,造成鏈的提前釋放與永久終止,從而殺死細胞:對革蘭氏陽(yáng)性菌作用最強,對酸桿菌次之,對革蘭氏陰性菌及真核微生物(藻類(lèi)、原生生物)亦有抑制;哺乳動(dòng)物和昆蟲(chóng)細胞在2μg/mL以上濃度、48h內即可被清除99%以上。此外,嘌呤霉素還表現出一定抗腫瘤活性,常被用作研究轉錄調控、細胞分化及基因表達順序的蛋白合成抑制劑。
抗性由pac基因編碼的嘌呤霉素N-乙酰轉移酶(PAC)賦予,該酶通過(guò)乙?;顾幬锸Щ?。由于pac基因已廣泛克隆至慢病毒、逆轉錄病毒及多種真核/原核表達載體,嘌呤霉素成為篩選和維持穩定轉染/感染細胞株(尤其是慢病毒系統)以及CRISPR/Cas9編輯后陽(yáng)性克隆的首選藥物。個(gè)別情況下亦可用于攜帶pac的大腸桿菌篩選。
本品為10mg/mL、經(jīng)0.22μm過(guò)濾除菌的嘌呤霉素鹽酸鹽水溶液,可直接用培養基稀釋。真核細胞常規篩選濃度1–10μg/mL,具體用量請依據細胞類(lèi)型預實(shí)驗確定。