BCECF AM, Cell Permeant pH熒光探針

【務(wù)必注意】：初次使用離子探針的用戶(hù)，強烈建議配合：Pluronic F-127, Cell Culture Tested 細胞培養級（NBS2009-1g）一起使用，以提高探針的水溶性和胞內加載性。 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

BCECF, AM是一種廣泛使用的檢測細胞質(zhì)pH值的熒光探針。具有細胞膜滲透性，進(jìn)入細胞后被胞內酯酶水解生成BCECF，一種極性熒光衍生物從而被保留在細胞內。BCECF在細胞內很穩定，排出半衰期超過(guò)2小時(shí)。胞內pH測定通過(guò)比率成像實(shí)現，通過(guò)確定pH依賴(lài)性的發(fā)射光強度比率（Ex=535nm），分別用490nm激發(fā)光激發(fā)和440nm激發(fā)光激發(fā)，使用熒光分光光度法（spectrofluorometry）或流式細胞儀檢測皆可。

BCECF,AM雖然主要用于哺乳動(dòng)物細胞，也有報道用于植物細胞、細菌和酵母等的細胞pH水平檢測。BCECF, AM還被廣泛用于各種功能實(shí)驗，如細胞活力和毒性、凋亡、粘附、趨化、藥物抗性等引起的細胞pH變化檢測。BCECF, AM還能用于包括鉀離子在內的其他離子的胞內變化檢測。

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO：117464-70-7

2） 化學(xué)名：3',6'-bis(acetyloxy)-5(or 6)-[[(acetyloxy)methoxy]carbonyl]-3-oxo-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthene]-2',7'-dipropanoic acid, 2',7'-bis[(acetyloxy)methyl] ester

3） 同義名：BCECF Acetoxymethyl ester; 2',7'-Bis-(2-Carboxyethyl)-5-(and-6)-Carboxyfluorescein, Acetoxymethyl Ester;

4） 分子式：C39H36O19

5） 分子量：808.69

6） 純度：≥95%

7） 外觀(guān)：類(lèi)白色至白色或淺黃色至暗黃色固體

8） 溶解性：溶于乙腈，DMSO，DMF

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，2年有效。

產(chǎn)品使用：

1、 儲存液制備

實(shí)驗前將低溫保存的BCECF, AM置于室溫回溫至少20min。用高質(zhì)量的無(wú)水DMSO溶解粉末，使其充分溶解，配制成1-10mM儲存液。按照單次用量分裝后置于≤-20℃避光干燥保存，六個(gè)月穩定。

【注意】：用水溶性緩沖液或培養基稀釋儲存液到需要濃度的工作液，現配現用，不可保存。正常的BCECF, AM溶液無(wú)色且無(wú)熒光（淺色和弱熒光可接受）。

2、 BCECF, AM的加載（哺乳動(dòng)物細胞）

大多數哺乳動(dòng)物細胞不需透化，直接用稀釋的細胞膜滲透BCECF, AM探針?lè )跤纯杉虞d。一旦進(jìn)入細胞，非特異酯酶水解非熒光AM前體，產(chǎn)生熒光且pH靈敏的探針。陽(yáng)離子探針BCECF的低泄露率和小的細胞內體積使得探針在胞內的終濃度明顯高于胞外孵育濃度?？傮w而言，與鈣離子探針比如Fura-2相比，以AM形式加載的BCECF更少出現胞內區域化。大量的實(shí)驗數據表明BCECF在細胞質(zhì)內是自由流動(dòng)和解離的。

注意事項：

1.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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