5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate pH熒光探針

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細胞內pH在許多細胞事件起著(zhù)重要的調節作用，這些事件包括細胞生長(cháng)、鈣調節、酶活力、受體介導的信號轉導、離子轉運、內吞、趨化性、細胞黏附和其他細胞進(jìn)程。發(fā)射pH敏感的熒光探針普遍用來(lái)監測胞內pH變化。使用pH熒光探針的成像技術(shù)允許研究人員以更高的空間分辨率調研這些事件，采樣密度可通過(guò)其他技術(shù)比如微電極來(lái)完成。

5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate，常簡(jiǎn)稱(chēng)為Carboxy SNARF-1 AM，是一種細胞膜滲透性的pH熒光探針，胞內去酯化后的pKa約為7.5，因此，適用于測定pH 7.0-8.0之間的pH變化。Carboxy SNARF-1在酸性和堿性條件下呈現出顯著(zhù)的pH依賴(lài)發(fā)射光遷移，從黃-橙色遷移到深紅色熒光。這一pH依賴(lài)性允許其測定雙發(fā)射波長(cháng)（通常為580nm和640nm）下的熒光強度比率，從而用來(lái)定量測定pH。

Carboxy SNARF-1特別適合帶可見(jiàn)光固定波長(cháng)激發(fā)源的儀器，包括共聚焦掃描顯微鏡、流式細胞儀和熒光酶標儀。該染料用氬離子激光器（488nm和514nm）都能良好激發(fā)。聯(lián)合Fura-2、Fluo-3和Indo-1能同時(shí)測定胞內pH和鈣離子。

產(chǎn)品特性：

1）  CAS NO：126208-13-7

2）  化學(xué)名：Spiro[7H-benzo[c]xanthene-7,1'(3H)isobenzofuran]-ar'-carboxylic acid, 3-(acetyloxy)-10- (dimethylamino)-3'-oxo-, (acetyloxy)methyl ester

3）  同義名：Carboxy SNARF-1 AM；C-SNARF-1 AM; 5-(6)-Carboxy RhodFluor, acetoxymethyl ester, acetate;

4）  分子式：C₃₂H₂₅NO₉

5）  分子量：567.55

6）  Ex/Em：激發(fā)波長(cháng)（4888~530nm），發(fā)射波長(cháng)（580nm and 640nm）

7）  溶解性：溶于DMSO

保存條件: 

20℃避光干燥保存，至少1年有效。

產(chǎn)品使用： 應用示例（來(lái)自文獻資源）

Ramshesh VK, Lemasters JJ. Imaging of mitochondrial pH using SNARF-1. Methods Mol Biol. 2012;810:243-248. doi:10.1007/978-1-61779-382-0_16. PMID: 22057572

SNARF-1加載方法：為了加載SNARF-1，培養的心肌細胞用5μM SNARF-1, Acetoxymethyl Ester（SNARF-1 AM）于37℃孵育45min。孵育過(guò)程中，胞內酯酶水解探針釋放SNARF-1 free acid使其保留在細胞漿內。細胞用KRH清洗兩遍，之后置于KRH或其它生理培養液內于顯微鏡下觀(guān)察。與其它的AM加載探針不同，SNARF-1能很好的加載進(jìn)入線(xiàn)粒體，雖然這類(lèi)加載可能具細胞特異性。為了促進(jìn)更好的線(xiàn)粒體吸收，細胞用SNARF-1 AM在更低的溫度（4-12℃）孵育更長(cháng)的時(shí)間。

Fig Confocal SNARF-1 ratio images of intracellular pH. A 1-day cultured cardiac myocyte was loaded with SNARF-1-AM (5 μM) for 45 min in culture medium at 37°C, and intracellular pH was measured by ratio imaging of SNARF-1 fluorescence before (baseline) and after 30, 40, and 42 min of chemical hypoxia.

注意事項：

1.      熒光染料都存在淬滅問(wèn)題，操作或保存過(guò)程中盡量避光，減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。