Human DiI-Ox-LDL (Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein)

人源紅色熒光標記氧化型低密度脂蛋白

搜索關(guān)鍵詞：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修飾Ox-LDL；乙?；揎?span>Ac-LDL；LDL receptor LDL受體；Cholesterol 膽固醇；Cholesteryl ester (CE) 膽固醇酯 ；Triglyceride (TG) 甘油三酯；Cardiovascular diseases 心血管疾??；Atherosclerosis (AS) 動(dòng)脈粥樣硬化； 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Human DiI-Ox-LDL (Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein)

人源紅色熒光標記氧化型低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品的背景知識，可見(jiàn)NoninBio整理的技術(shù)文章：脂蛋白類(lèi)型與作用機理。

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產(chǎn)品訂購：

溫馨提示：由于脂蛋白的保存周期比較短，約6周。本司一般都是接到訂單后再生產(chǎn)，從而保證客戶(hù)拿到最長(cháng)效期的產(chǎn)品。所以，我們貨期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡(jiǎn)稱(chēng)為LDL）是血液中五種常見(jiàn)脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白（VLDL）通過(guò)脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其喪失部分甘油三酯轉化而來(lái)。LDL是主要的膽固醇和膽固醇酯轉運體，占血漿脂蛋白總量的一半以上。LDL通過(guò)受體介導的內吞作用被肝臟和其他組織吸收。LDL適用于心血管研究和脂質(zhì)運輸研究，也適用于LDL代謝及其與心血管疾病的關(guān)聯(lián)性研究。還能用作細胞標志物和疾病標志物。

氧化的LDL（Oxidized LDL，Ox-LDL）是修飾LDL中的一種，還包括乙?；?span>LDL、以及丙二醛（MDA）、4-羥烯酸（4-HNE）直接結合的LDL，這些未經(jīng)氧化修飾，僅僅是經(jīng)一般化學(xué)修飾的LDL稱(chēng)為衍化LDL。兩者都可被清道夫受體識別，誘導泡沫細胞的形成。但兩者之間也有些差異，主要表現在：1）細胞生理功能方面，Ox-LDL可誘發(fā)細胞毒性作用，影響花生四烯酸代謝，抑制膽固醇酯化作用等，但衍化LDL無(wú)上述效應；2）Ox-LDL消耗LDL內源性抗氧化物質(zhì)，使LDL上的維生素E含量下降，而MDA-LDL無(wú)上述效應；3）Ox-LDL涉及脂質(zhì)過(guò)氧化反應，LDL中的PUFAs被氧化。MDA對LDL修飾，是直接和ApoB-100結合成希夫氏堿，脂質(zhì)過(guò)氧化反應輕微；4）LDL的氧化修飾中，在氧化程度低時(shí)，ApoB降解；在氧化程度高時(shí)，ApoB又可發(fā)生再聚合。MDA-LDL的修飾中，ApoB無(wú)降解、聚合發(fā)生；5）Ox-LDL 的熒光峰波長(cháng)為430nm，而MDA -LDL的熒光峰波長(cháng)為460nm。

LDL氧化修飾的方式有很多種，常見(jiàn)的有：1）細胞介導的LDL氧化修飾，又稱(chēng)為生物氧化修飾的LDL。如內皮細胞，巨噬細胞，單核細胞都具有此功能；2）過(guò)度金屬離子介導的LDL氧化修飾，如Ca2+，Fe2+等；3）還有其他形式的氧化修飾，包括物理方法如紫外線(xiàn)，或過(guò)氧化物酶催化。

本品是由紅色熒光探針DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）標記的人源氧化LDL（Human Ox-LDL）。DiI- Ox-LDL具有高受體結合力，且是一種廣為認知的膽固醇遞呈增強劑?？赏ㄟ^(guò)熒光顯微鏡或流式細胞儀來(lái)鑒定和觀(guān)察細胞培養物內的泡沫細胞。也可用來(lái)誘導巨噬細胞的泡沫細胞形成。本品為無(wú)菌包裝，可用PBS磷酸鹽緩沖液或細胞培養基直接稀釋使用即可。

產(chǎn)品特性：

1. 濃度：1.0-4.0 mg/ml
2. 外觀(guān)：乳狀液體
3. 緩沖液組分：PBS（不含EDTA），pH 7.4

保存與運輸方法：

保存：2-8℃保存，收到貨后6周有效。避免強光直射，不可凍存！

運輸：冰袋運輸。

注意事項：

1. 本品的稀釋工作液極不穩定，建議現配現用； 

2. 本品長(cháng)期貯存可能會(huì )有沉淀析出，屬于正?，F象，低速離心2 min去除沉淀后使用即可；

3. LDL與LDL受體的結合需要Ca2+和Mn2+的參與，過(guò)量EDTA的存在會(huì )抑制其結合；

4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟：

1. 無(wú)菌條件下，將Human DiI-Ox-LDL用細胞培養基稀釋至20-40 μg/ml。

2. 加入活細胞內，37℃培養3-6小時(shí)。

3.  孵育結束，吸去含Human DiI-Ox-LDL的培養基，并用無(wú)探針的培養基洗幾次。

4. 根據實(shí)驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

a）熒光顯微鏡觀(guān)察

采用標準的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長(cháng)為：Ex/Em=554nm/571nm）；若需要請使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機溶劑?！咀ⅰ啃柙O陽(yáng)性細胞以做對照。

b）流式細胞分選

胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液，選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽(yáng)性對照，從而進(jìn)行流式分選設門(mén)（gate）。（建議使用波長(cháng)為554 nm；Em：571nm）。

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注意事項：

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。