Human DiI-LDL (Human DiI-Low Density Lipoprotein)

紅色熒光標記人源低密度脂蛋白

搜索關(guān)鍵詞：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修飾Ox-LDL；乙?；揎?span>Ac-LDL；LDL receptor LDL受體；Cholesterol膽固醇；Cholesteryl ester (CE)膽固醇酯 ；Triglyceride (TG)甘油三酯；Cardiovascular diseases心血管疾??；Atherosclerosis (AS)動(dòng)脈粥樣硬化； 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Human DiI-LDL (Human DiI-Low Density Lipoprotein)紅色熒光標記人源低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品的背景知識，可見(jiàn)NoninBio整理的技術(shù)文章：脂蛋白類(lèi)型與作用機理。

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產(chǎn)品訂購：

溫馨提示：由于脂蛋白的保存周期比較短，約6周。本司一般都是接到訂單后再生產(chǎn)，從而保證客戶(hù)拿到最長(cháng)效期的產(chǎn)品。所以，我們貨期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡(jiǎn)稱(chēng)為LDL）是血液中五種常見(jiàn)脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白（VLDL）通過(guò)脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其喪失部分甘油三酯轉化而來(lái)。LDL是主要的膽固醇和膽固醇酯轉運體，占血漿脂蛋白總量的一半以上。LDL通過(guò)受體介導的內吞作用被肝臟和其他組織吸收。LDL受體的胞漿結構域促進(jìn)衣被小窩（膜上富集受體區域）的形成，而受體的配基結構域可識別LDL的apo-B100，進(jìn)而引起披網(wǎng)格蛋白小泡產(chǎn)生。ATP依賴(lài)的質(zhì)子泵降低小泡內環(huán)境pH，引起LDL與受體解離，一旦喪失連接到溶酶體的披網(wǎng)格蛋白小泡，導致多肽和膽固醇酯的酶水解發(fā)生。之后LDL受體重新循環(huán)到細胞膜。研究顯示胰島素、三碘甲狀腺原氨酸（T3）和地塞米松都能參與調控LDL受體介導的內吞。LDL作為一個(gè)大蛋白（Mw 3500kDa），直徑25.8nm，由約20-25%蛋白和75-80%脂質(zhì)構成。其中脂質(zhì)部分由9%游離膽固醇、62%膽固醇酯、20-24%磷脂和5%甘油三酯組成。

本品是紅色熒光探針DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）標記的人源LDL（Human LDL），用來(lái)觀(guān)察培養細胞的LDL結合位點(diǎn)，或篩選LDL受體表達缺陷型的細胞突變株。也可通過(guò)流式細胞術(shù)評估細胞受體水平或檢測組織的受體水平。DiI-LDL是細胞內吞研究的極好標記物。通過(guò)納米顆粒的片段穿透進(jìn)入細胞膜，用來(lái)分離和培養臍帶血來(lái)源的造血干細胞。也能將脂肪和膽固醇通過(guò)血液流動(dòng)運輸到全身。本品為無(wú)菌包裝，可用PBS磷酸鹽緩沖液或細胞培養基直接稀釋使用即可。

產(chǎn)品特性：

1. 濃度：0.8-4.0 mg/ml
2. 外觀(guān)：乳狀液體
3. 緩沖液組分：PBS（不含EDTA），pH 7.4

4. 吸光度比例：Dil/Protein=555nm/275nm=1.30

保存與運輸方法：

保存：2-8℃避光保存，6周有效。不可凍存！操作時(shí)注意無(wú)菌操作！

運輸：冰袋運輸。

注意事項：

1. 本品的稀釋工作液極不穩定，建議現配現用； 

2. 本品長(cháng)期貯存可能會(huì )有沉淀析出，屬于正?，F象，低速離心2 min去除沉淀后使用即可；

3. LDL與LDL受體的結合需要Ca2+和Mn2+的參與，過(guò)量EDTA的存在會(huì )抑制其結合；

4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟：

1. 無(wú)菌條件下，將Human DiI-LDL用細胞培養基稀釋至20-40 μg/ml。

2. 加入活細胞內，37℃培養3-6小時(shí)。

3. 孵育結束，吸去含Human DiI-LDL的培養基，并用無(wú)探針的培養基洗幾次。

4. 根據實(shí)驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

a）熒光顯微鏡觀(guān)察

采用標準的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長(cháng)為：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要請使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機溶劑?！咀ⅰ啃柙O陽(yáng)性細胞以做對照。

b）流式細胞分選

胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液，選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽(yáng)性對照，從而進(jìn)行流式分選設門(mén)（gate）。（建議使用波長(cháng)為Ex：488/514/549nm；Em：565nm）。

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注意事項：

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。