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(NA0531) Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

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(NA0531) Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)
NA0531-1ML
NA0531-5ML
NA0531-10ML
品牌:NoninBio
促銷(xiāo): 450.00~3600.00
價(jià)格: 565.00~4500.00
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Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

目錄號

NA0531-1ML



規格

1ml

運輸溫度

冰袋運輸

其他名稱(chēng)

Blasticidin   S Hydrochloride 滅瘟素S鹽酸鹽;稻瘟散;

保存溫度

-20℃保存

CAS號

3513-03-9

有效期

2年

應用

穩定轉染細胞篩選抗生素

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S(滅瘟素)(10   mg/ml)

 

產(chǎn)品標簽

Blasticidin 殺稻瘟菌素;10mg/ml;bls 乙酰轉移酶基因;bsr或BSD   脫氨酶基因;遺傳霉素G418;Hygromycin     B 潮霉素B;CAS:3513-03-9

 

產(chǎn)品描述

Blasticidin S(殺稻瘟菌素),也稱(chēng)為滅瘟素S鹽酸鹽,稻瘟散,從灰色鏈霉菌Streptomyces   griseochromogenes分離到的一種核苷肽類(lèi)抗生素。主要通過(guò)干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性抑制原核和真核細胞的蛋白質(zhì)合成。殺稻瘟菌素S用于篩選攜帶bsr或BSD基因的轉染細胞。殺稻瘟菌素S具有快速而強效的作用模式,一個(gè)星期內完成陽(yáng)性克隆的篩選,且很低的抗生素濃度便能導致細胞迅速死亡。

 

本品為溶于HEPES buffer,pH 7.5的無(wú)菌溶液,濃度為10mg/ml。用于細菌篩選的常用濃度為25-100μg/ml,用于哺乳動(dòng)物細胞篩選的常用濃度為1-50μg/ml,初次實(shí)驗建議通過(guò)滅殺曲線(xiàn)來(lái)確定最佳使用濃度。

 

產(chǎn)品特性

1)同義名:Blasticidin   S   Hydrochloride滅瘟素S鹽酸鹽;稻瘟散;

2)CAS NO.:3513-03-9

3)分子式:C17H26N8O5·HCl

4)分子量:458.9

5)純度:>95%(HPLC)

6)化學(xué)結構式:

     

 

保存與運輸方法

保存:-20℃保存,2年有效,避免反復凍融。

運輸:冰袋運輸。

 

使用濃度

1)大腸桿菌(E. coli)(常用濃度:25-100μg/ml)

E. Coli對Blasticidin   S敏感性很弱,但含Blasticidin S抗性的轉化子可在低鹽LB固體培養基(pH 8.0),100μg/ml Blasticidin   S的條件下進(jìn)行篩選。高pH可增強抗生素篩選活性。

 

2)哺乳動(dòng)物細胞(常用濃度:1-50μg/ml)

哺乳動(dòng)物細胞系BlasticidinS的常用工作濃度范圍1-50 μg/ml。初次實(shí)驗建議通過(guò)滅殺曲線(xiàn)來(lái)確定最佳使用濃度。

一些哺乳動(dòng)物細胞的建議工作濃度:

細胞系                          

培養基                             

Blasticidin篩選濃度          

CHO

DMEM

5-10μg/ml

HEK293

DMEM

5-15μg/ml

HeLa

DMEM

2.5-10μg/ml

Neuro2a

DMEM

30μg/ml

B16

RMPI

3-10μg/ml

PC1.0

RMPI

10-30μg/ml

THP-1

RMPI

10μg/ml

 

操作步驟

Blasticidin S常用濃度范圍1-50 μg/ml,以10 μg/ml為多,初次實(shí)驗建議通過(guò)滅殺曲線(xiàn)來(lái)確定最佳使用濃度。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉染到細胞后,用含有Blasticidin S的正常生長(cháng)培養基來(lái)篩選穩轉克隆。

1)轉染48h后,用含適宜濃度Blasticidin   S的新鮮培養基將細胞傳代;【注】:細胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作最好。細胞密度太高,抗生素效率降低。分盤(pán)時(shí)覆蓋率最好不超過(guò)25%。

2)每3-4天去除舊培養基,加入含相同濃度Blasticidin S的新鮮培養基;

3)7天后評估細胞集落形成。根據宿主細胞種類(lèi)和轉染/篩選效率,集落形成可能需要再增加一周或更久。

4)轉移5-10個(gè)抗性克隆到35mm細胞培養盤(pán),加入選擇培養基維持培養7天。隨后進(jìn)行細胞毒性檢測。

 

注意事項

1)Blasticidin S為有毒化合物,操作時(shí)需注意防護,切勿與身體或皮膚直接接觸。

2)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。