Polyplus通用型DNA/siRNA轉染試劑jetPRIME?(101000046)

jetPRIME transfection reagent

貨號：101000046   1.5 mL;

101000027   0.1 mL

品牌：Polyplus 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

jetPRIME?是一種功能強大、用途廣泛的DNA和siRNA轉染試劑，用于日常實(shí)驗，可產(chǎn)生高效可靠的科學(xué)結果。jetPRIME?可確保在各種粘附細胞中實(shí)現高DNA轉染效率和優(yōu)異的基因沉默。jetPRIME?也是DNA/siRNA共轉染或幾種質(zhì)粒共遞送的理想選擇。此外，Polyplus的jetPRIME?試劑對細胞非常溫和，因為它在轉染過(guò)程中需要少量的試劑和核酸。

一、卓越的轉染效率

jetPRIME?是一種用于日常實(shí)驗的強大轉染試劑。它導致不同來(lái)源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的比例異常高。對于幾種常用的細胞系，與頂級競爭對手的試劑相比，jetPRIME?試劑獲得了70%至90%的優(yōu)異轉染效率（圖1和圖2）。

圖1 jetPRIME與其主要競爭對手的轉染效率比較。在24孔板中轉染后24小時(shí)，通過(guò)FACS分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對Lipofectamine?2000和jetPRIME?的建議使用條件。

圖2:jetPRIME?與Lipofectamine?3000的轉染效率比較。在96孔板或24孔板中轉染后24小時(shí)，通過(guò)FACS分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對lipofectamine?3000和jetPRIME?的建議使用條件。

二、成本效益：更少的DNA和更少的試劑

jetPRIME?是一種高效的體外轉染試劑，需要少量試劑和質(zhì)粒DNA，使用成本效益非常高（表1）。

表1 推薦使用條件。根據制造商的建議，用于轉染的6孔板中每個(gè)孔的DNA和試劑（jetPRIME?和競爭對手）的量。

除了降低成本外，使用更少的DNA還可以最大限度地減少轉染引發(fā)的不良細胞毒性作用。因此，jetPRIME?是高轉染效率和優(yōu)異細胞活力的首選試劑。

三、更好的細胞活力

jetPRIME?在轉染過(guò)程中對細胞極為溫和，可提高細胞活力并改善轉染結果。用jetPRIME?轉染的細胞是健康的，而用競爭對手觀(guān)察到主要的細胞毒性（圖3）。

圖3 轉染后24小時(shí)細胞活力。根據制造商對每種試劑的建議進(jìn)行轉染后24小時(shí)HeLa細胞的相位對比顯微鏡檢查。

四、易于使用的protocol

jetPRIME?是一種易于使用的轉染試劑（圖4）：

快速方便地放大和縮??；

與血清和抗生素兼容。

圖4 jetPRIME? protocol。DNA、siRNA以及DNA和siRNA共轉染的方便方案。

產(chǎn)品應用：

一、質(zhì)粒轉染

jetPRIME?可導致不同來(lái)源的轉染粘附細胞系以及原代細胞的百分比顯著(zhù)較高（表1）。

表1 使用jetPRIME?的各種細胞類(lèi)型的轉染效率。轉染后24小時(shí)通過(guò)FACS分析測定GFP陽(yáng)性細胞的百分比。

質(zhì)粒是常見(jiàn)于細菌中的環(huán)狀DNA小分子。質(zhì)粒與染色體DNA分開(kāi)存在和復制，在細菌中，質(zhì)粒通常攜帶有利于細菌生存的基因。質(zhì)?？梢员挥幸獾匾胨璧募毎?，并用于在特定細胞系中過(guò)表達感興趣的基因。這種過(guò)程被稱(chēng)為DNA轉染，是研究感興趣的基因功能或蛋白質(zhì)的常用方法。

二、基因組編輯

CRISPR/Cas9系統在哺乳動(dòng)物細胞中的使用最近已經(jīng)成為在特定基因座修飾細胞基因組的一種非常方便的方法。它涉及將（a）編碼Cas9的一個(gè)或多個(gè)質(zhì)粒、特異性gRNA和最終要插入的序列，或（b）一個(gè)或兩個(gè)質(zhì)粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬時(shí)轉染到哺乳動(dòng)物細胞中。

三、siRNA轉染

jetPRIME?可使多種細胞系的內源性基因表達降低90%以上。例如，jetPRIME?介導的用靶向HeLa細胞中內源性層粘連蛋白A/C的10nM siRNA雙鏈體轉染HeLa細胞，將層粘連蛋白/C基因表達顯著(zhù)降低到幾乎無(wú)法檢測的水平（圖1）。

圖1  使用jetPRIME?的內源性層粘連蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer層粘連蛋白A/C siRNA轉染HeLa細胞。48小時(shí)后，使用抗層粘連蛋白A/C的抗體通過(guò)免疫熒光顯微鏡評估層粘連蛋白/C沉默。

四、不同核酸的共轉染

jetPRIME?非常適合DNA和siRNA/miRNA共轉染實(shí)驗或幾種DNA質(zhì)粒的共遞送。

Polyplus用jetPRIME?進(jìn)行了DNA和siRNA遞送，并在各種毒性極低的細胞系中觀(guān)察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在貼壁細胞中實(shí)現了超過(guò)90%的沉默（圖2）。

圖2 使用jetPRIME?進(jìn)行DNA和siRNA共轉染后，幾種細胞系中的外源性螢光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM熒光素酶siRNA進(jìn)行實(shí)驗。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

 ★  高DNA轉染效率；

 ★  核酸含量低；

 ★  優(yōu)越的細胞活力；

 ★  一種用于DNA和/或siRNA轉染的試劑；

 ★  性?xún)r(jià)比高。

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