Luminol 魯米諾

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

魯米諾（Luminol），也稱(chēng)為3-氨基苯二甲酰肼（3-Aminophthalhydrazide），是過(guò)氧化物酶（PO, HRP）的一種化學(xué)發(fā)光底物，也能靈敏檢測反應性氧化物（ROS）。

辣根過(guò)氧化物酶（HRP）是抗體的一種常用標志酶，在過(guò)氧化氫（H₂O₂）存在的體系能夠催化魯米諾的化學(xué)發(fā)光氧化反應。此轉化實(shí)驗用于超靈敏的ELISA實(shí)驗，使用超靈敏的閃爍計數器能檢測到低水平的冷光。魯米諾還能用于許多其他反應體系，結合HRP/H₂O₂的其他酶體系。魯米諾能用作刑事偵查中的血液染色劑。

魯米諾和H₂O₂的混合溶液一旦接觸到血紅蛋白，血紅蛋白內的鐵離子加速魯米諾的化學(xué)發(fā)光氧化反應。魯米諾還能用作金屬離子介導的氧化事件的化學(xué)發(fā)光檢測探針，但是活細胞推薦用MCLA檢測。

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO：521-31-3

2） 化學(xué)名：5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione 5-氨基-2,3-二氫-1,4-二氮雜萘二酮

3） 同義名：3-Aminophthalhydrazide 3-氨基苯二甲酰肼；發(fā)光氨；NSC 5064；

4） 分子式：C8H7N3O2

5） 分子量：177.16

6） 純度：≥98%

7） 外觀(guān)：類(lèi)白色至淡黃色粉末，有時(shí)帶褐色或綠色光澤

8） 溶解性：易溶于堿溶液，DMSO（50mg/ml），溶于熱乙酸，乙醇和乙醚，幾乎不溶于水

9）化學(xué)結構圖：

保存條件: 

室溫避光保存，3年有效。

產(chǎn)品使用：

1．  基于HRP的免疫實(shí)驗（HRP Immunoassays）

堿性溶液中魯米諾立即被氧化，以可見(jiàn)光的形式釋放能量。該反應可在各種溶液體系內進(jìn)行，包括水和非質(zhì)子溶劑（DMSO或DMF），氧化機制根據溶劑會(huì )有變化，對需要的反應條件稍有差異。在非質(zhì)子溶劑體系，僅需要分子氧和一個(gè)強堿基即可產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光（λmax = 485 nm）。在水溶性體系，需要一個(gè)強堿，或分子氧或過(guò)氧化物和一個(gè)助氧化劑比如次氯酸鹽或過(guò)硼酸鹽來(lái)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光（λmax = 425 nm）。產(chǎn)生熒光的實(shí)際化合物是氨基鄰苯二甲酸根離子（aminophthalate）(見(jiàn)下魯米諾反應機理圖1)。

圖1. 魯米諾反應機理圖。此反應魯米諾溶于含少量二價(jià)硫酸銅的堿性溶液，并與弱氧化劑（0.3% H₂O₂）反應。首先，堿性溶液中魯米諾轉化成共振穩定的二價(jià)陰離子1，然后被H₂O₂氧化成二羧酸離子2，伴隨分子氮N2的釋放。當分子2形成后，處于激發(fā)電子態(tài)（高能量），通過(guò)釋放光分子（hv）來(lái)排泄“多余”的能量，使得分子回到基態(tài)3。

2．  血液推定實(shí)驗（Presumptive test for blood）

加3.5g過(guò)硼酸鈉到500ml蒸餾水使之完全溶解，再加25g碳酸鈉和9.5g魯米諾使其溶解。之后靜置溶液5min，使得任何不溶物沉降。然后將溶液倒入塑料噴壺內，待用。

使用時(shí)，以細霧的形式噴灑在待檢測表面。真正的血跡會(huì )發(fā)冷光，呈穩定的光澤持續幾秒。為了更好的觀(guān)察，背景場(chǎng)景需盡可能的黑暗。值得注意的是此測試僅是推定的，由于該反應使用血紅素內的鐵離子催化氧化和后續的發(fā)光。而銅離子污染物的存在會(huì )加速氧化。

3．  魯米諾對銅離子的分析實(shí)驗血液推定實(shí)驗（Analytical test for copper - Luminol）

試劑配制：溶解0.1g魯米諾到10ml濃氨，之后用蒸餾水稀釋到100ml。使用前，取1ml上述溶液加入4ml蒸餾水，并與0.5ml 0.3% H₂O₂混合均勻。取0.5ml溶液到一小測試管內，往內加入含銅離子或鐵離子的待測溶液。當待測液內至少含0.13ug銅離子或0.25ug鐵離子情況下，能觀(guān)察到待測液發(fā)藍紫色光。稀釋下限是1：2500000。用定量光度計檢測來(lái)建立標準曲線(xiàn)。

注意事項：

1.      魯米諾基本不溶于水，但易溶于堿性溶液（飽和溶解~200mg/ml）。魯米諾溶液對光和金屬離子不穩定。魯米諾熱不穩定，魯米諾和魯米諾溶液保存的過(guò)程中需要避光和高溫。

2.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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