產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):外泌體熒光染料(DiR)
產(chǎn)品貨號:NW3201
產(chǎn)品規格:200 μL(1 mM)
產(chǎn)品保存:-20℃避光(1 年有效)
DiR是一種親脂性的近紅外熒光花青染料。其兩個(gè)18-碳鏈可以與細胞膜或親脂性生物分子結合,從而進(jìn)行特定、穩定的染色。DiR所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過(guò)細胞和組織,所以常用于活體成像和示蹤。
產(chǎn)品參數
分子式:C63H101IN2
分子量:1013.4
溶劑:DMSO
λEx/λEm(MeOH) = 748/780 nm
常見(jiàn)問(wèn)題:
1、 活體成像對外泌體濃度要求較高,建議用于染料標記的外泌體原始濃度達到0.5~1.5 μg/μL,外泌體濃度過(guò)低實(shí)驗失敗風(fēng)險較高。
2、 外泌體染色步驟中去除游離染料的第3、4步必不可少,以避免游離染料對后期實(shí)驗的干擾。這一步相當于重新提取外泌體,所有外泌體提取純化方式都適用。
3、 DiR碘化物(DiR染料)的發(fā)射波長(cháng)肉眼不可見(jiàn),需要使用配備CCD鏡頭或其他設備的近紅外檢測儀器,建議使用活體成像儀。
4、 建議染料標記的外泌體在注射后24 h內設置梯度時(shí)間進(jìn)行觀(guān)測,多數情況下,在注射后2~8 h熒光強度達到峰值。為保證觀(guān)察結果,小動(dòng)物需要做剃毛處理。
5、 由于以下兩個(gè)原因,建議制備2倍于活體成像或示蹤實(shí)驗所需外泌體量以進(jìn)行染料標記:1)外泌體染色效率難以達到100%;2)在去游離染料過(guò)程中無(wú)法避免外泌體的損失。