HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝規格 |
NBS0015-5ml | HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 5*1 mL |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品是一款使用SYBR Green Ⅰ嵌合熒光法進(jìn)行 qPCR 反應的專(zhuān)用預混液。核心組分Hot-start Taq是基于抗體法修飾,搭配針對qPCR系統優(yōu)化的最適 Buffer,顯著(zhù)提高了擴增特異性和低拷貝基因的檢測靈敏度,能夠在寬廣的定量范圍內得到優(yōu)異的擴增線(xiàn)型,對靶基因進(jìn)行準確定量、檢測,重復性好,可信度高。本產(chǎn)品中含有 ROX Reference Dye,適用于大部分qPCR 儀器。本產(chǎn)品是一款2 × 預混液,只需額外加入引物、模板即可,使用方便。
圖1所示,以Hela細胞為CDNA模板,使用HS UniversalaPCR Master Mix和其他品牌的產(chǎn)品,在同等條件下擴增相同的基因。實(shí)驗結果顯示,NoninBio品牌的HS Universal gPCR Master Mix 擴增效率更高,熒光強度更強,可以獲得更高的擴增平臺值。
圖2所示,以Hela細胞轉錄組cDNA為模板,使用HS UniversalqPCR Master Mix,ROX plus和其他品牌的產(chǎn)品,在同等條件下擴增相同的基因,實(shí)驗結果顯示,NoninBio品牌的HS Universal qPCRMaster Mix,ROX plus相對其他品牌,擴增效率更高,熒光強度更強,溶解曲線(xiàn)更集中尖銳。
實(shí)驗流程
配置如下 PCR 反應體系
成分 | 體積 |
2 × HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 10 μL |
Primer F(10 μM) | 0.4 μL |
Primer R(10 μM) | 0.4 μL |
Template DNA | X μL |
ddH2O | Up to 20 μL |
表 1. HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus 反應體系
建議 PCR 程序
溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數 | |
預變性 | 95℃ | 30 sec~3 min | 1 Cycle |
循環(huán)反應 | 95℃ | 10 sec | 40 Cycles |
55-60℃ | 10~30 sec | ||
溶解曲線(xiàn) | 95℃ | 15 sec | 1 Cycle |
60℃ | 60 sec | ||
95℃ | 15 sec |
表 2. HS Universal qPCR Master Mix , ROX plus反應程序
注:95℃ 30 sec 該預變性條件適合大多數擴增反應,如模板結構復雜,GC含量高,可將預變性時(shí)間延長(cháng)至3 min,以提高預變性效果,同時(shí)酶活可以更高程度釋放,得到更好的實(shí)驗結果。
注意事項:
1. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。