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(NBS4211) 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷

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(NBS4211) 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷

5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷
貨號:NBS4211-50mg;
NBS4211-250mg
品牌:NoninBio
價(jià)格: 565.00~1490.00
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50mg 250mg

5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2-脫氧尿苷
 

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱(chēng)

包裝規格

NBS4211-50mg

5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2-脫氧尿苷

50mg

NBS4211-250mg

5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2-脫氧尿苷

250mg


產(chǎn)品描述

EdU,英文全稱(chēng)5-Ethynyl-2'-deoxyuridine,中文全稱(chēng)5-乙炔基-2’-脫氧尿苷,是BrdU(5-溴-2’-脫氧尿苷)的新型替代物,可直接檢測活躍的DNA合成或細胞周期的S期合成。作為胸苷的核苷類(lèi)似物,可插入細胞培養物或動(dòng)物體內處于活躍合成期的細胞DNA,無(wú)明顯毒性。EdU的檢測基于高效的點(diǎn)擊化學(xué)反應(click reaction),是由I價(jià)銅離子催化的疊氮化物和炔烴化合物之間的反應過(guò)程。EdU含有炔烴基,可與含疊氮基團的熒光探針?lè )磻纬煞€定的三唑環(huán)。


借EdU的點(diǎn)擊反應進(jìn)行DNA檢測的優(yōu)勢是非常顯而易見(jiàn)的。含疊氮基團熒光探針的小分子量使得EdU能在溫和條件插入DNA,這相反于BrdU為基礎的反應,后者需要DNA變性(通常使用HCl,加熱或DNase消化)促使BrdU暴露,從而被抗BrdU抗體檢測到。因此,少了變性步驟的EdU反應流程快鍵方便,可得到高重復性的結果,并且能輕易的與相關(guān)抗體檢測靶標包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白cyclin B1等進(jìn)行多重分析,通過(guò)流式細胞儀、熒光顯微鏡或高通量成像儀(HCS)來(lái)檢測。


產(chǎn)品特性

1)CAS NO:61135-33-9

2)同義名:2'-deoxy-5-ethynyl-uridine2’-脫氧-5-乙炔基-尿苷, 2'-deoxy-5-Ethynyluridine, 5-EdU,EdU

3)分子式:C11H12N2O5

4)分子量:252.23 g/mol

5)純度:≥98% (HPLC)

6)外觀(guān):白色至類(lèi)白色固體

7)溶解性:溶于DMSO(20mg/ml),無(wú)水乙醇(~25mg/ml),PBS, pH 7.2(~10 mg/ml)

8)化學(xué)結構:


保存與運輸方法

保存:-20°C干燥保存,至少2年有效。

運輸:冰袋運輸。


常見(jiàn)問(wèn)題(FAQs)

1. 是否任何細胞型都能插入EdU?

答:不是。細胞必須含嘧啶核苷酸補救合成途徑(pyrimidine salvage pathway),沒(méi)有該途徑,EdU不能被磷酸化進(jìn)而不能插入復制中的DNA。


2. EdU儲存液如何制備?

答:體外細胞實(shí)驗,取適量EdU(Mw:252.23)溶于DMSO或生理緩沖液配制10mM母液,按單次用量分裝,置于≤-20°C凍存,1年穩定。


3. 如何進(jìn)行EdU標記?

起始實(shí)驗建議測試一系列EdU濃度來(lái)確定最佳濃度。如果目前有進(jìn)行基于BrdU的標記實(shí)驗,可選擇相似的濃度和標記時(shí)間作為起始EdU標記條件。更低量的EdU可能達到同BrdU的標記效果,最優(yōu)濃度根據標記時(shí)間有所變化,原則上濃度越低,標記時(shí)間越長(cháng)。

對于細胞培養物——哺乳動(dòng)物和植物細胞用0.1–10 μM EdU孵育0.5-3h能達到相對理想的標記;

對于活體動(dòng)物——根據注射方式、給藥次數和檢測位置有所變化。參考相應文獻進(jìn)行優(yōu)化調整。


4. 如何進(jìn)行EdU檢測?

使用含疊氮基團的熒光探針如TAMRA azide,Alexa Fluor azide(包括Alexa fluor 488, 555, 594, 647)等,在含有CuSO4的染色反應液中進(jìn)行熒光染色?;蛘咧苯邮褂梦宜咎峁┑?strong>EdU增殖檢測試劑盒(成像或流式檢測),含有所有檢測組分,使用方便。


注意事項

1)EdU是一種能插入DNA的核苷類(lèi)似物,操作過(guò)程一定要注意防護,不要與皮膚直接接觸。另需戴口罩避免粉塵吸入。

2)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。