英文名稱(chēng):Tissue Digestive Mix-I
貨號:C3501-0020,C3501-0100,
規格:20ml/瓶、100ml/瓶
價(jià)格:詢(xún)價(jià)
【預期用途】
用于從組織上消化原代干細胞,做后續細胞體外增值培養。培養后的細胞僅用于體外分析檢測,不作為治療使用。
【檢驗原理】
以特定酶自組織塊分離出原代間充質(zhì)干細胞是常見(jiàn)的細胞培養技術(shù)。組織消化液利用數種重組表達的消化酶制備而成,無(wú)動(dòng)物源成分。組織消化液針對組織的細胞外基質(zhì)而設計, 不含胰酶,不會(huì )傷害細胞??梢杂行У叵毎饣|(zhì),進(jìn)而從組織塊 (臍帶、脂肪、胎盤(pán)) 分離出大量的原代間充質(zhì)干細胞,作為后續細胞增殖使用。
【主要組成成分】
由 DMEM -LG 基礎培養基、膠原脢、分散脢、脫氧核糖核酸酶組成。
【適用范圍】
收獲組織 (臍帶、脂肪、胎盤(pán))的原代間充質(zhì)干細胞, 做后續細胞體外增殖培養。
【儲存條件及有效期】
應貯存在-10~-20℃,有效期為1年。開(kāi)封后存放4℃,注意避光,1周內使用。不建議反復凍融。
【生產(chǎn)日期與失效日期】
詳見(jiàn)產(chǎn)品標簽。
【使用方法】
以臍帶組織為例
1. 將臍帶用DPBS 漂洗干凈,剪成1-50px大小,剔除血管。
2. 將組織塊剪成3-5mm3,移入50ml離心管,再加入適量的分離液。
* 一條長(cháng)度10公分的臍帶建議加入10ml的分
離液;或者組織塊 : 分離液(vol)= 1:1。
** 視情況而定,可自行在分離液中添加1%青
鏈雙抗。
3. 把50ml離心管橫放在37度細胞培養箱,過(guò)夜反應(16小時(shí))。
* 若總反應體積較大,也可持續旋轉混合。
4. 加入和分離液等體積的0.05%EDTA終止反應后,1500 xg離心5分鐘,去除上清。
* 溶液比較濃稠,小心不要影響下層的細胞; 建
議留下5ml左右的溶液。
** 沒(méi)有EDTA, 可使用無(wú)鈣鎂DPBS取代。
5. 以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細胞后,500 xg離心5分鐘,去除上清。
6. 再次以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細胞后,250 xg離心5分鐘,去除上清。
7. 用適量的培養基重懸細胞后,即可按常規細胞培養方法接種P0代細胞培養。
* 消化后的原代細胞,建議培養時(shí)接種密度提高
到10,000/cm2以上;傳代后即可按常規的接
種密度培養 。
以皮下脂肪組織塊為例
1. 以DPBS將新鮮的皮下脂肪組織塊漂洗干凈,剔除明顯的血管或血塊。
2. 將組織塊剪成3-5mm3,移入50ml離心管,再加入適量的分離液。
* 1克組織塊可加入約5ml分離液。
** 視情況而定,可自行在分離液中添加1%青鏈雙抗。
3. 把50ml離心管橫放在37度細胞培養箱,反應4小時(shí) (用戶(hù)也可自行調整反應時(shí)間)。
* 若總反應體積較大,也可使用持續旋轉混合。
4. 加入和分離液等體積的0.05%EDTA
終止反應后,250 xg離心5分鐘,去除上清。
* 沒(méi)有EDTA, 也可使用無(wú)鈣鎂DPBS取代。
5. 以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細胞后,
250 xg離心5分鐘,去除上清。
6. 再次以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細
胞后,250 xg離心5分鐘,去除上清。
7. 用適量的培養基重懸細胞,再以100目的篩網(wǎng)
過(guò)濾細胞液后,即可按常規細胞培養方法接種
細胞培養。
* 消化后的原代細胞,建議培養時(shí)接種密度提高
到10,000/cm2以上;傳代后即可按常規的接
種密度培養。
【產(chǎn)品性能指標】
1. pH值:7.0-8.0
2. 滲透壓(MOSM/KG):310-345
3. 無(wú)菌檢測:無(wú)菌
4. 內毒素(EU/ml):<10
5. 原代細胞分離實(shí)驗:>80%
【注意事項】
1. 本品僅用于體外診斷,不用于臨床治療,嚴禁內服,不能用嘴吸液。
2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴禁使用。
3. 操作過(guò)程應避免污染。
4. 操作人員萬(wàn)一與皮膚、粘膜接觸,請立即用自來(lái)水沖洗。
5. 禁止使用超出規定有效期的產(chǎn)品。
【備案人/生產(chǎn)企業(yè)】
上海達特希爾生物科技有限公司
生產(chǎn)地址/住所:中國(上海)自由貿易試驗區祖沖之路 1505弄80號12幢3樓C,D區
郵政編碼:201203
電話(huà)號碼:021-58785545
傳真號碼:021-58777053
【售后服務(wù)單位】
上海達特希爾生物科技有限公司
【產(chǎn)品技術(shù)要求編號】
滬浦械備20200167號
【醫療器械備案憑證編號】
滬浦械備20200167號
【生產(chǎn)備案憑證編號】
滬浦食藥監械生產(chǎn)備20152128號
【說(shuō)明書(shū)批準及修改日期】
2021年09月17日