Zinpyr-1, Cell Permeant 鋅離子熒光探針

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Zinpyr-1（ZP-1）是一種具細胞膜滲透性的熒光探針，選擇性檢測鋅離子（Zn²⁺）（K_d= 0.7 ± 0.1 nM）。一旦與金屬離子復合，誘發(fā)熒光信號產(chǎn)生?；罴毎麅?，Zinpyr-1主要對高爾基或高爾基關(guān)聯(lián)的囊泡染色。隨著(zhù)鋅離子濃度增高，Zinpyr-1的激發(fā)波長(cháng)從515nm遷移到507nm，發(fā)射波長(cháng)范圍在513-558nm。還能用作PET傳感器。

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO.：288574-78-7

2） 化學(xué)名：4',5'-bis[[bis(2-pyridinylmethyl)amino]methyl]-2',7'-dichloro-3',6'-dihydroxy-spiro[isobenzofuran -1(3H),9'-[9H]xanthen]-3-one

3） 同義名：ZP-1; 4′,5′-Bis[bis(2-pyridylmethyl)aminomethyl]-2′,7′-dichlorofluorescein;

4） 分子式：C₄₆H₃₆Cl₂N₆O₅

5） 分子量：823.72

6） Ex/Em：515-507nm/513-558nm

7） 純度：≥95%

8） 外觀(guān)：固體

9） 溶解性：溶于DMSO

10）化學(xué)結構圖：

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，2年有效。

產(chǎn)品使用：（來(lái)自文獻，僅作參考）

1）文獻：Penninger P, Riedelberger M, Tsymala I, Arzani H, Jenull S, Kuchler K. Quantification of zinc intoxication of Candida glabrata after phagocytosis by primary macrophages. STAR Protoc. 2021;2(1):100352. Published 2021 Feb 20. doi:10.1016/j.xpro.2021.100352

實(shí)驗目的：研究巨噬細胞吞噬引起Zn²⁺介導的真菌致病菌格拉布勒他念珠菌（C. glabrata）清除能力。用Zn²⁺特異性探針- Zinpyr-1和碘化丙啶（PI）雙重檢測Zn²⁺水平和細胞活力的變化。

使用方法：Zinpyr-1溶于DMSO配制成10mM儲存液，按照10μl/管分裝置于-20℃避光凍存，避免反復凍融。于實(shí)驗前，將儲存液用PBS稀釋到10μM工作液。工作液現配現用。將含探針的染色工作液加入巨噬細胞（感染念珠菌）于37℃孵育30min。流式細胞儀分析染色結果，Zinpyr-1的激發(fā)和發(fā)射波長(cháng)約為488nm和525nm。

Fig. Visualization of viable Candida glabrata inside phagolysosomes

(A) Gating strategy for analysis of C. glabrata by flow cytometry. The PI-Zinpyr panel compares untreated (black) with heat-stressed (red) C. glabrata.

(B) Percentage of dead C. glabrata, comparing untreated and heat-stressed fungal cells before interaction with BMDMs.

(C) Live and dead C. glabrata populations are analyzed for their zinc-dependent signal intensity (MdFI) equaling the intracellular amount of labile zinc in fungal cells. MdFI, median fluorescence intensity.

2）文獻：Scott A. Sinclair et al. The use of the zinc-fluorophore, Zinpyr-1, in the study of zinc homeostasis in Arabidopsis roots. New Phytologist. Volume174, Issue1 April 2007 Pages 39-45

實(shí)驗目的：使用鋅離子熒光探針- Zinpyr-1來(lái)檢測擬南芥根部Zn²⁺的分布。

使用方法：Zinpyr-1溶于DMSO配制成1mM儲存液，置于-20℃避光凍存，避免反復凍融。之后用0.9%生理鹽水稀釋到工作濃度。7-8天的幼苗用含10mM EDTA的去離子水清洗3遍，之后浸入含5-20μM Zinpyr-1的工作液內，于室溫避光孵育3h。之后用去離子水清洗，再浸入含75μM PI的溶液降細胞壁染紅，再清洗。樣本用0.9%生理鹽水封片后，用共聚焦顯微鏡觀(guān)察，用488nm激發(fā)器激發(fā)，分別用FITC和Texas red 濾片來(lái)觀(guān)察。

注意事項：

1.      由于產(chǎn)品量少，收到本品后需直接在瓶?jì)热芙馀渲颇敢骸?/span>

2.      熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

3.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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