莫能霉素 Monensin(蛋白轉運抑制劑)
細胞因子(Cytokines)表達水平高低直接反映細胞在特異性刺激劑(物)下的應答活動(dòng),免疫學(xué)研究通常使用適當的刺激劑來(lái)激活細胞應答,并通過(guò)某些藥物如莫能霉素(monensin)或布雷非德菌素A(Brefeldin A,BFA)作用以阻斷胞內高爾基體介導的蛋白轉運,促使細胞因子累積,提高細胞因子的胞內信號,從而能借助流式分選技術(shù)(FACS)檢測細胞因子的表達水平。細胞因子表達具有自身的特征性。
常見(jiàn)的蛋白轉運抑制劑:
1、Monensin 莫能霉素,CAS:22373-78-0
簡(jiǎn)單描述:天然離子載體(ionophore),選擇性結合單價(jià)陽(yáng)離子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+,并將這些陽(yáng)離子轉運到細胞膜內??善茐母郀柣w,抑制細胞內的蛋白轉運,常用作蛋白轉運抑制劑,用于抑制細胞因子等分泌型蛋白的分泌,使其保留在細胞內。
2、Brefeldin A(BFA,布雷非德菌素A),CAS:20350-15-6
簡(jiǎn)單描述:一種常用的蛋白轉運抑制劑,特異性地可逆地阻斷蛋白質(zhì)從內質(zhì)網(wǎng)(ER)轉運到高爾基體(Golgi)。經(jīng)BFA處理,高爾基體很快被破壞并融合到內質(zhì)網(wǎng)上,該過(guò)程呈現能量、溫度和微管依賴(lài)性。BFA是一種真菌代謝物,最初曾用作抗病毒試劑,現主要用于研究蛋白轉運。BFA也常被用于抑制細胞因子等蛋白的分泌,并用于增強分泌蛋白的免疫染色檢測。BFA可激活神經(jīng)鞘磷脂循環(huán)(sphingomyelin cycle),還可誘導一些腫瘤細胞發(fā)生凋亡。
一些應用實(shí)例:
細胞因子 | 克隆號 | 靶向細胞 | 刺激物 | 刺激時(shí)間 | 蛋白轉運抑制劑 | 表面標志蛋白 |
IL-2 | JES6-5H4 | Splenocytes | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
IL-3 | MP2-8F8 | Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days | PMA (20 ng/ml) Plus ionomycin (1μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD4 |
GM-CSF | MP1-22E9 | Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
IFN-γ | XMG1.2 | Splenocytes | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
訂購信息:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝規格 |
100mg | ||
1ml | ||
5mg | ||
25mg | ||
200μl | ||
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